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當前位置:首頁技術文章滿滿的干貨(一):質粒DNA的提取,濃度會分析了嗎?

滿滿的干貨(一):質粒DNA的提取,濃度會分析了嗎?

更新時間:2025-08-29點擊次數:310

本期主題 什么是吸光值?

A260、A280和A230是紫外分光光度計在核酸濃度和純度檢測中常用的波長。通過這些波長的吸光值,可以計算出A260/A280和A260/A230比值,用于評估DNA或RNA的純度。在質粒DNA提取中,比值異常通常反映樣本被特定雜質污染。

下面先對質粒DNA濃度各數值代表的含義進行下詳細的介紹。

一、各吸光值含義

二、理想的比值范圍

對于更精確的定量,建議使用Qubit熒光定量或RiboGreen定量方法。

三、質粒DNA比值異常原因分析

因此,對于質粒DNA而言,吸光值超出正常范圍時,實際濃度便會有不準確性,建議若有電泳結果,需要將NanoDrop測定的比值結合瓊脂糖凝膠電泳的亮度一起判斷質粒質量。

四、濃度虛高或偏低

● 質粒構型(如超螺旋、線性、開環)不同,在瓊脂糖凝膠上的遷移速度不同,導致亮度與實際濃度不符。

● RNA殘留(未充分降解的小RNA片段)污染,殘留的RNA會在電泳上最下面看到有亮帶殘留,干擾對質粒濃度的判斷。

● 蛋白質或酚類物質污染,紫外分光光度計測得的A260值偏高,導致質粒濃度虛高。

● 斷裂的DNA片段,導致電泳亮度降低,但濃度測定仍顯示較高值。

五、索萊寶質粒提取試劑盒:

提取純化質粒DNA的得力助手,真實!

質粒是一種小型、環狀的DNA分子,存在于細菌等微生物中。它們獨立于細菌的染色體DNA存在,能夠自主復制,并且可以攜帶各種基因。它們是科學家們手中的“基因載體",能夠幫助我們實現基因的轉移、表達和調控。在分子生物學實驗中,質粒提取是一項基礎且關鍵的操作。一個優質的質粒提取試劑盒,能夠幫助科研人員快速、高效地獲取高質量的質粒DNA。

主要的應用領域


基因克隆獲取大量目標基因;基因庫構建;基因序列分析

基因表達:蛋白質生產;功能研究

遺傳工程:基因編輯;基因治療;轉基因生物

基因調控研究:啟動子分析;轉錄因子研究;信號通路研究

生物制藥:藥物開發;疫苗制備;基因治療藥物

教育和科研工具:教學實驗;科研工具


顯著優勢


操作簡便,省時高效,安全環保

流程標準化:無需有毒試劑,避免傳統方法中苯-酚、氯-仿等危險化學品的使用,只需離心即可完成。

快速提取:通常30-60分鐘即可獲得高純度質粒DNA,適合高通量實驗需求。


高純度、高得率

采用柱式純化技術,結合裂解和吸附配方,有效去除雜質(如RNA、蛋白質、基因組DNA)。

A260/A280=1.8-2.0,A260/A230=2.0-2.5,確保質粒提取的高濃度。


兼容性強,適用范圍廣

適用于多種大腸桿菌菌株,如DH5α等,對不同質粒均可輕松提取。

不同規模需求:從微量(1-5mL)到大量(100mL)培養物均可匹配。

下游應用廣:可直接用于PCR、酶切、轉化等高靈敏度實驗。


靈活選擇(不同級別試劑盒)

普通級:常規克隆、篩選

去內毒素級:細胞轉染、基因治療


索萊寶質粒提取試劑盒產品

貨號

名稱

D1100

質粒小量提取試劑盒

D1110

質粒大量提取試劑盒

D1120

革蘭氏陽性菌質粒小量提取試劑盒

D1130

革蘭氏陽性菌質粒大量提取試劑盒

D1140

去內毒素質粒小量提取試劑盒

D1150

去內毒素質粒大量提取試劑盒

D1160

酵母質粒小量提取試劑盒

DM1100

質粒小量提取試劑盒(磁珠法)


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