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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC1965-100T/48S
更新時間：2024-04-10
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：1634
010-50973130
產品分類
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土壤漆酶
活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC1965
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 液體3 mL×1瓶 | 常溫保存 |
溶液的配制：
試劑二：臨用前取1瓶加7.5 mL試劑一溶解，現用現配，并且盡快使用，用不完的試劑2-8℃可保存一周；若試劑變色則不能使用。
試劑三：若有白色物質析出，放于37℃中溶解即可。
產品說明：
土壤漆酶（SL）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。
漆酶分解底物ABTS產生ABTS自由基，在420nm處的吸光系數遠大于底物ABTS，測定ABTS自由基的增加速率，可計算得漆酶活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、低溫離心機、恒溫培養箱/水浴鍋、可調式移液器、震蕩儀、研缽、30-50目篩。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干，過30~50目篩。
二、測定步驟
分光光度計/酶標儀預熱30min以上，調節波長到420nm，分光光度計蒸餾水調零。
加樣表：
| 試劑名稱 | 測定管 | 對照管 |
| 土樣（g） | 0.03 | 0.03 |
| 試劑一（μL） | 135 | 135 |
| 試劑二（μL） | 150 | - |
| 置于37℃水浴鍋或37℃恒溫培養箱準確反應10min。 | ||
| 試劑三（μL） | 15 | 15 |
| 試劑二（μL） | - | 150 |
| 4℃，12000g 離心15min，取200μL上清于420nm測定其吸光值，分別記為A測定管、A對照管，計算ΔA測定=A測定管-A對照管。每個測定管需設一個對照管。 | ||
注意事項：
測定之前進行預實驗，若吸光值較高（A>1.5），請減少土樣質量再進行測定。若數值偏小可以延長反應時間或增加土樣質量進行測定。計算時注意相對應修改計算公式。
離心后若上清仍然渾濁，可再次離心去除。
實驗實例：
稱取兩份0.03g三葉草土于1.5mLEP管中，分別為測定管及對照管，之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.421-0.23=0.191，按土樣質量計算酶活得：
SL活性（U/g土樣）=1.39×ΔA測定÷W= 1.39×0.191÷0.03=8.84 U/g 土樣。
稱取兩份0.03g林土樣于1.5mLEP管中，分別為測定管及對照管，之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=1.009-0.463=0.546，按土樣質量計算酶活得：
SL活性（U/g土樣）=1.39×ΔA測定÷W= 1.39×0.546÷0.03=25.30 U/g 土樣。
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